2022年尾，
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，，USP<621>Chromatography指南的修订版生效，
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，，日本随之宣布了第十八版日本药典第一次增补本。。其内容是将划定了市售医药品通过色谱法等要领举行检测的USP专论，
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，，更新为通过超高速、高性能色谱法（UHPLC）举行试验。。在将专论试验法转换为UHPLC时，
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，，不需要举行重新验证，
，
，，可在坚持以往实验要领的疏散性能的同时，
，
，，实现缩短时间、节约溶剂的本钱优势。。另外，
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，，其内容不但适用于等度疏散，
，
，，还适用于梯度疏散。。我们将详细说明在举行尺寸排阻色谱剖析时，
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，，凭证新版USP划定，
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，，L59类型色谱柱以及转换为UHPLC-SEC要领时的条件设定。。

一、SEC剖析要领的转换

      USP对影响疏散的因素，
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，，如色谱柱内径(dc)、长度(L)、填料内径(dp)、流速(Fc)等参数做出了更改，
，
，，不但以短柱确保了不低于原有检测法的疏散性能，
，
，，还实现了缩短时间、节约溶剂的优势。。将与USP（L59）对应的色谱柱TSKgel G3000SWXL（5μm，
，
，，HPLC）色谱柱转换为TSKgel UP-SW3000-LS（2 μm，
，
，，UHPLC）时，
，
，，流速转变允许规模如下表所示。。作为参考，
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，，若是是串联2支TSKgel G3000SWXL色谱柱、以高疏散度为目的的色谱柱系统的质量治理/剖析法的情形下，
，
，，使用30cm的TSKgel UP-SW3000-LS色谱柱，
，
，，也可获得相同的疏散效果。。

*  使用2支30cm（串联2支色谱柱）时，
，
，，与UHPLC 30cm色谱柱相同

** 应在不凌驾色谱柱最大压降的流速下使用

二、从HPLC-SEC（30cm色谱柱）转换为UHPLC-SEC（15cm色谱柱）

     剖析单克隆抗体时，
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，，从30 cm 的TSKgel G3000SWXL色谱柱转换为15 cm 的TSKge UP-SW3000色谱柱的剖析示例如下图所示。。在切合USP划定的剖析条件下举行UHPLC疏散，
，
，，在确保疏散度为一律以上的同时，
，
，，剖析时间镌汰了约50%，
，
，，流动相也镌汰了约80%。。

三、从HPLC-SEC（30cm色谱柱×2支）转换为UHPLC-SEC（30cm色谱柱）的剖析实例

     在举行质控剖析时，
，
，，为了提高疏散度有时会串联2支30 cm的TSKgel G3000SWXL色谱柱举行剖析。。在这种情形下，
，
，，可转换为使用30 cm的TSKgel UP-SW3000色谱柱举行UHPLC剖析。。

四、梯度疏散时从HPLC转换为UHPLC

      修订后的USP给出了使用梯度疏散的其他色谱剖析模式从HPLC转换为UHPLC的划定。。举行梯度疏散时，
，
，，需要追加设定梯度体积、梯度坡度等项目。。关于重大的条件设定，
，
，，由于主要装备制造商的UHPLC系统支持切合USP划定的软件，
，
，，以是可使用该类软件设定实验要领的条件。。

      若是您有色谱柱使用或维护保养方面的任何问题，
，
，，接待联系Z6尊龙凯时手艺中心。。