2. 正相使用

新柱子可直接用流动相。。。。推荐先用正己烷-乙腈(99：1)以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积，，再凭证流动相选用极性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速冲10倍柱体积，，zui后换成流动相。。。。

正相使用时，，不宜剖析含醛基、羰基的化合物，，不可用于还原糖的剖析;流动相要*脱气，，并不得含有羰基化合物和过氧化物(质量欠好的yi醚、四氢呋喃含有少量)。。。。

任何时间替换流动相时都要确保新流动相与柱子原生涯液可互溶。。。。

3 反相使用

先用正己烷-乙腈(99：1)以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积，，再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、异丙醇、甲醇、甲醇-水(50：50)冲柱子。。。。

以0.5ml/min的流速用30倍柱体积的pH11.0的氢氧化钠(LUNA)水溶液冲柱子(注重pH值切不可凌驾11.0)，，连忙用水( 0.5ml/min的流速，，30倍柱体积)冲洗，，再换成流动相。。。。

配制流动相时，，应各组分划分量取，，比例较小的组分要细密量取，，需调pH值时要细密到0.1。。。。

反相条件下使用时，，要特殊注重控制pH值规模，，pH值越低越有爆发水解的危险，，流动相中水的比例越高虽然也越有爆发水解的危险。。。。的pH规模在pH 3.0-7.0

若是要使用的流动相中还含有缓冲盐类，，建议在用剖析流动相之前，，先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡，，这样可阻止缓冲盐在剖析柱内的析出。。。。

有一种情形是，，当使用氨基柱举行酸性物质的剖析时，，酸性物质的保存意味着质子的保存，，可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化，，导致使用一段时间后关于某些类的剖析物保存性子有所改变或体现在柱效下降。。。。建议：用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗该柱(冲洗后虽然要再用不含碱的流动相洗去多余氨)，，之后再举行剖析这类酸性剖析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。。。。

4 色谱柱的冲洗：简朴提及来，，正相条件下使用的氨基柱就参照硅胶柱的洗濯要领;反相条件下使用的氨基柱就参照C18的洗濯要领。。。。

5 色谱柱的生涯

正相使用时，，将柱子冲洗清洁后，，用正己烷-乙腈(99：1)生涯。。。。

反相使用时，，如短期不必，，可用甲醇或乙腈生涯;恒久不必时需将甲醇依次用异丙醇、氯仿置换，，zui后用正己烷生涯。。。。