C4反相色谱柱在经由出厂测试后是生涯在乙腈-水中的；；由于色谱柱在贮存或运输历程中牢靠相可能会干掉，，这会引起键合相的空间结构爆发转变。。 。。因此，，新的色谱柱在用来剖析样品之前，，请一定要充分平衡色谱柱。。 。。
C4反相色谱柱的平衡要领是：以纯乙腈或甲醇作流动相，，首先用低流速0.2ml/min将色谱柱平衡住宿（请注重断开检测器�。。 。。�，，然后，，将流速增添到0.8mL/min冲洗30min以便将色谱柱的填料充分平衡至*状态。。 。。平衡历程中，，将流速缓慢地提高直到获得稳固的基线，，这样可以包管色谱柱的使用寿命，，并且包管在以后的使用中，，获得剖析效果的重现性。。 。。请一定确保所使用的流动相和乙腈-水互溶。。 。。若是您所使用的流动相中含有缓冲盐，，应注重首先用20倍柱体积的5%的乙腈-水流动相“过渡”，，然后使用剖析样品的流动相直至获得稳固的基线。。 。。
关于正相色谱柱来讲，，硅胶柱或极性色谱柱需要更长的时间来平衡。。 。。这些色谱柱在出厂测试后是生涯在正庚烷中的，，若是极性色谱柱需要使用含水的流动相，，请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡。。 。。C4反相色谱柱当使用乙醇、异丙醇、乙酸等粘度大的流动相时，，色谱柱的平衡时间要延伸，，甚至要加倍。。 。。
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