TSK凝胶色谱柱的主要参数:
⑴柱体积:柱体积是指凝胶装柱后,,,从柱的底板到凝胶沉积外貌的体积。。在色谱柱中充满凝胶的部分称为凝胶床,,,因引柱体积又称“床”体积,,,常用Vt 体现。。
⑵外水体积:色谱柱内凝胶颗粒间隙,,,这部分体积称外水体积,,,亦称间隙体积,,,常用Vo体现。。
⑶内水体积:由于凝胶为三维网状结构,,,颗粒内部仍有空间,,,液体可进入颗粒内部,,,这就分间隙的总和为内水体积,,,又称定相体积,,,常用Vi体现。。 不包括固体支持物的体积(Vg)。。
⑷峰洗脱体积:是指被疏散物质通过凝胶柱所需洗脱液有体积,,,常用Ve 体现。。当使用样品的体积很少时,,,(与洗脱体积较量可以忽略不计),,,在洗脱图中,,,从加样到峰顶位置所用洗脱液体积为Ve。。 当样品体积与洗脱体积较量不可忽略时,,,洗脱体积盘算可以从样品体积的一半到峰顶位置。。当样品很大时,,,洗脱体积盘算可以从应用样品最先到洗脱峰升高的弯曲点(或半高处)。。
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TSK凝胶色谱柱凝胶的种类:
(一)交联葡聚糖凝胶(Sephadex)
⑴ Sephadex G交联葡聚糖的商品名为Sephndex,,,差别规格型号的葡聚糖用英文字母G体现,,,G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。。例如,,,G-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克,,,同样G-200克每克千胶吸水20克。。交联葡聚糖凝胶的种类有G-10,,,G-15,,,G-25,,,G-50,,,G-75,,,G-100,,,G-150,,,和G-200。。因此,,,“G”反应,,,凝胶的交联水平,,,膨胀水平及分部规模。。
⑵ Sephadex LH-20,,,是─Sephadex G-25的羧丙基衍生物,,, 能溶于水及亲脂溶剂,,,用于疏散不溶于水的物质。。
(二)琼脂糖凝胶:
商品名许多,,,常见的有,,,Sepharose(瑞典,,,pharmacia ),,,Bio-Gel-A(美国Bio-Rad)等。。琼脂糖凝胶是依赖糖链之间的次级链如氢键来维持网状结构,,,网状结构的疏密依赖琼脂糖的浓度。。一样平常情形下,,,它的结构是稳固的,,,可以在许多条件下使用(如水,,,pH4-9规模内的盐溶液)。。琼脂糖凝胶在40℃以上最先融化,,,也不可高压消毒,,,可用化学灭菌活处置惩罚。。
(三)聚丙烯酰胺凝胶:
是一种人工合成凝胶,,,是以丙烯酰胺为单位,,, 由甲叉双丙烯酰胺交联成的,,,经干燥破损或加工成形制成粒状,,,控制交联剂的用量可制成种种型号的凝胶。。交联剂越多,,,孔隙越小。。聚丙烯酰胺凝胶的商品为生物胶——P (Bio-Gel P),,,由美国Bio-Rod厂生产,,,型号许多,,,从P-2至P-300共10种,,,P 后面的数字再乘1000就相当于该凝胶的排阻限度。。
(四)聚苯乙烯凝胶
商品为Styrogel ,,, 具有大网孔结构,,, 可用于疏散分子量1600到40,,,000,,,000的生物大分子,,,适用于有机多聚物,,,分子量测定和脂溶性自然物的分级,,,凝胶机械强度好,,,洗脱剂可用甲基亚砜。。